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篇名 建立臺灣土雞胚幹細胞之培養條件
並列篇名 Establishment of culture conditions for Taiwan country chicken ES cells
作者 蔡安平 唐品琦
頁次 201-201
關鍵詞 胚幹細胞 分化多能性基因 Embryonic stem cells Pluripotent genes
出刊日期 201712
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本研究之主要目的為自臺灣土雞雞胚分離出胚幹細胞,並建立一可維持其未分化狀態之培養條 件。自 30 個 Stage X 雞胚之透明區(area pellucida)取出胚盤細胞(blastodermal cells)後, 逢機分配至三種培養條件, 第一組為雞隻胚幹細胞培養液(DMEM 培養液添加胎牛與雞血 清,以及 LIF,稱之為 cESCM 培養組),第二組為以 cESCM 先培養雞胚纖維母細胞後, 再收集此培養液進行雞隻胚盤細胞之培養,此組稱之為 conditioned medium(CM 培養組), 第三組為 cESCM 配合 STO 飼養層細胞共培養雞隻胚盤細胞,稱之為 STO 培養組。細胞經 過 24 天培養、4 次繼代(passages)後,雖然各組細胞數目均逐漸減少,但STO 培養組之細 胞數於四次繼代中,以及第三、四次繼代,均分別顯著高於 cESCM 組與 CM 組(P < 0.05); 分別以 anti-SSEA-1 與 anti-SSEA-4 抗體進行細胞免疫染色法,發現三組均可發現 SSEA-1 陽性細胞;而以即時反轉錄聚合酶鏈鎖反應(real-time RT-PCR)檢測分化多能性基因,POU V 與 Sox2,結果顯示,以三種不同培養方式培養之胚盤細胞,均可表現 POU V 與 Sox2 基因, 但於第四次繼代之後,只能於 STO 組檢測出 POU V 之表現。依目前所得之結果得知,cESCM 與 CM 培養方式至少可以維持雞隻胚盤細胞兩次繼代時間,而 STO 培養組可用來進行較長 期之雞隻胚幹細胞培養。